核酸检测假阳性、假阴性的问题一直是专家们的心头病，而核酸标本的采集和保存成为影响检测结果的重中之重，很多专家从实践工作中总结出的经验认为，鼻咽拭子标本新冠核酸检测阳性率高于口咽拭子，下呼吸道采集的痰、肺泡灌洗液标本阳性率高于上呼吸道的口咽、鼻咽拭子采集的标本，为了提高检测阳性率，建议采集同一病人多部位标本，合并进行检测，下面我们来看看标本在采集、运输、保存过程中应该注意哪些问题？

病毒保存液标本采集方法：

用于新冠核酸检测标本的主要是口咽拭子，采集时让患者张大嘴后用特制棉签或小刷头刮取其咽部采集带病毒标本。如果平时医护人员咽拭子采样不多，刮取标本时患者的反应又比较大，往往导致刮取标本的位置不对，或力度和时间不够，没有刮取到带病毒的标本或刮取到的带病毒标本量太少，最后导致检测结果阴性。

采集标本的注意事项：

①、不要从鼻孔或扁桃体上采样；

②、不建议雾化导痰；

③、下呼吸道标本（相对于上呼吸道标本）更可能呈阳性；

④、对于怀疑患感染新型冠状病毒的患者，特别是肺炎或严重疾病的患者，单个上呼吸道标本不能排除诊断，建议增加上呼吸道和下呼吸道标本。

标本运输和保存条件：

新冠病毒又称为RNA病毒，很容易被外源性或细胞破坏后所释放的RNA酶降解，而影响最后的检测效率。严格来讲标本采集后应及时送到实验室（疾控中心、医院检验科、第三方实验室），尽快完成检测。标本在常温条件下放置时间过长，也可能是造成最后检测结果假阴性的原因，如果因为特殊需要长时间保存的话，可以用病毒保存液；来保存RNA病毒样本，此外还可以使用防止病毒核酸降解的标本采集管，但目前此类产品数量最少、成本高、实际应用效果也需要进一步评价。

总的来说，标本采集后应及时送检，及时检测，如因某些原因标本采集后不能及时送检，应将采样后的拭子放入病毒保存液中，病毒保存液是病毒采样管内添加的用于保护病毒样本的保护性液体！

自疫情以来，病毒采样管大量的投入使用，也大大减轻了医务人员的压力。这一次，实施病毒采样管的生产将带来更多的便利。病毒采样管价格合理，病毒采样管的分发和使用可以更好地帮助医务人员收集病毒并监控样本，这些样本被广泛使用，方便且干净。

因为病毒采样管是一套完整的离心管，可用于采样和运输病毒样本，因此，一次性使用病毒采样管很安全也很方便。一次性病毒采样管在出厂前都会进行消毒灭菌，也不用担心污染问题。

病毒采样管还可以用来存储鼻咽拭子样本或者是细胞组织样本，已在特定位置进行必要的细胞培养或者是送到检测实验室进行聚合酶链反应提取和检测。

考虑到医务人员和患者在使用病毒采样管时感觉舒适，方便等，在制作采样器时不仅要考虑使用方法，还要考虑其外观等情况。在大量的生产使用中，我们使用白色柔软的植绒来适应不同的人群。同时，合理的设计使其使用更加方便，并且经过单独包装和进行了辐射灭菌，使用非常便捷。

一次性病毒采样管是目前病毒检测的重要环节，一次性病毒采样管主要分为灭活型和非灭活型，目前常用的为灭活型，因为灭活型一次性病毒采样管是无菌的，更能满足检测需求。

深圳市华晨阳科技有限公司，成立于2008年6月2日，公司坐落于广东省深圳市宝安区，公司面积15000平方米，注册资金5000万元，现有员工300余人，是一家致力于核酸检测、分子诊断、医学检验、病毒检测等第一类、第二类、第三类医疗器械产品研发、生产、销售于一体的国家级高新技术企业。
华晨阳科技致力于生物样本采集与保存医疗产品，是著名的医疗采样保存产品专业制造商，公司拥有52项专利，其中30项专利已经转化应用于市场。产品主要应用于基因检测、生物制药、大型甲等医院、出入境检验检疫、诊断试剂、疾控中心、公安刑侦、法医鉴定等医疗机构。公司陆续与国内30余所高校、50余家国家科研机构、200余家三甲医院、600余家疾病预防控制中心、1000余家基因检测第三方医学检验机构建立了良好的合作关系。
公司自主研发产品有：一次性使用病毒采样管、一次性采样拭子、医用棉签、细胞保存液、唾液采集装置、运送培养基、一次性使用采样器、一次性使用取样器、样本保存液、核酸提取试剂，基因检测试剂等产品。公司产品均获得中国NMPA、欧盟CE、美国FDA EUA、SGS、TUV、TGA、ISO13485认证资质，拥有多国产品注册商标专用权与销售权，产品远销欧洲、美洲、亚洲、中东等120个国家，获得广大客户的一致好评与认可。
深圳市华晨阳科技有限公司将以“传承创新、科技制胜”为宗旨，秉承“质量至上、求实创新、诚信守法、合作共赢”的企业文化，努力打造中国高端生物样本采集保存医疗产品，铸就微生物样本采集与保存产品行业标杆！

病毒保存液具备什么优势？

①、我们的病毒保存液是在10万级净化车间内的百级操作空间中的全自动定量分装设备生产的，保证生产过程中的全程无菌。最后经伽马射线辐照处理过的产品避免了由于生产流程控制原因导致保存液被其他细菌所污染。

②、我们是通过大量实验，从基础液、缓冲体系、蛋白稳定剂、冷冻保护剂、氨基酸等营养成分对细胞的影响总结归纳出最适合细胞生产和保存的保存液配方，确保了病毒保存的高效性，极大提高了病毒培养的阳性率。

③、抗生素，选用庆大霉素与真菌抗生素，更好的抑制细菌和真菌。避免传统采样液中青霉素可能引起的人体致敏现象。

④、我们的品质有保障，配有近15年的专业团队提供技术和服务，产品稳定，批次差异小，可以提供灭活型和非灭活型的病毒保存液，各种型号齐全。

病毒保存液具备什么优势？

病毒采样管的优势：

①、采样管管壁及管盖加厚设计，耐静态挤压和动态撞击。底部锥形设计，耐离心和震荡。瓶盖内侧防漏圈与瓶盖底部防渗设计，双重保险，杜绝渗漏。保证运输过程中样本不泄漏。符合联合国UN2814SHENGWU 安全规定。

②、管身及管盖为聚丙烯材质，高温高压（121℃，15min）无变形低温（-80℃）不变脆。保存过程无漏液，保证保存过程中样本不泄漏。符合联合国生物安全规定。

③、管身及管盖无热原，无DNA、RNA酶，毒性残留量测试符合标准，对样本无毒害。保证采样管本身不会对样本有毒害作用。

④、完全兼容或半自动微生物检测工作站，产品可立（底部圆锥形防漏设计，带裙边可站立，）规格合适、便于使用和保存。

⑤、独特的喇叭口设计，使采样管可随管盖转动自动插入盖内。

病毒采样管的保存液起到什么作用？

病毒采样管的保存液可以让在采集后的病毒样本维持活性、延长样本中病毒存活时间，还可以对病毒样本进行保存和运输。

为什么需要用病毒采样管的保存液？

因为病毒是一种非常微小的生物，是由核酸和蛋白外壳构成的，没有自己的代谢机构，没有蛋白酶系统。因此病毒离开宿主细胞的话，就没法继续生存了。这么微小的生物却能给我们带来很多疾病，如常见的流行传染病通常是RNA病毒、流感病毒、艾滋病毒和甲流病毒等。

灭活病毒保存液可以起到什么作用？

灭活型病毒保存液可以对新鲜的临床病毒标本进行蛋白变形而起到病毒灭活作用，杜绝二次传播感染，保障运输及检测人员的安全。已灭活的样本可以搭配多种病毒提取试剂盒进行使用，核酸提取仪快速提取核酸，同时配合呼吸道病原体PCR检测试剂盒实现快速检测，特异性灵敏度均不受影响。

非灭活型病毒保存液可以起到什么作用？

非灭活型病毒保存液具有抗细菌和抗真菌的作用，可以在病毒的蛋白质外壳形成一种保护膜，使其不易分解，保证病毒的完整性；有助于增加病毒的生存时间和感染稳定性。

病毒保存液还具有哪些功能？

①、操作简单，液体内含有能让蛋白变性的成分，从而起到病毒灭活的作用；

②、内含抑制剂，更大程度地保护病毒核酸稳定不被降解，大幅度提高核酸提取率；

③、产品采样前可常温保存12个月，采样后样本可常温保存一周，密闭性好，方便保存运输，节省运输成本。

病毒采样管保存液中的抗菌抗生素

病毒保存液是用于病毒的采样、运输保存和检测的溶液介质，添加了病毒保存液内，有灭活型和非灭活型两种。其中，非灭活保存液需要添加抗菌抗生素，包括抗细菌抗生素和抗真菌抗生素。

非灭活型病毒保存液由于需要保存病毒的核酸以及蛋白膜上的抗原表位，需保留完整的病毒结构，尽量延长病毒体外存活时间，因此需要添加细菌和真菌的抗生素防止长菌对病毒造成干扰。细菌抗生素通常用的是庆大霉素，这里主要介绍几种抗真菌抗生素。

病毒采样管保存液中的抗菌抗生素

两性霉素b：上世纪50年代由链霉菌的培养液中分离而得到的一种多烯类光谱抗深部真菌感染的抗生素。pH在4~10时稳定，在中性或酸性介质中可形成盐，引起抗菌活性降低。它能选择性地与真菌胞浆膜上的麦角固醇相结合，在膜上形成微孔或通道，从而改变胞浆膜的通透性，导致真菌细胞内钠离子、核苷酸、氨基酸等物质外漏，正常代谢被破坏而起到抑菌的作用。

制霉素：

制霉素是一种多烯型抗生素，具有共轭多烯大环内酯结构，与良性霉素结构类似，能抑制真菌和皮藓菌的活性，对细菌无抑制作用。

灰黄霉素：

灰黄霉素能抑制真菌有丝分裂，使有丝分裂的纺锤结构断裂，终止中期细胞分裂。本品沉积在皮肤、毛发的角蛋白的前体细胞内，能促使角蛋白抵抗真菌的侵入；当感染角蛋白脱落后，代之以健康组织。对表皮藓菌属、小孢子菌属和毛藓菌属引起的皮肤真菌感染有效，对其他真菌感染包括念珠菌属以及细菌无效。此外，酮康唑、特比萘芬、十一烯酸、水杨酸等药物也具有抗真菌的作用。

深圳市华晨阳科技有限公司的非灭活病毒保存液中添加有抗细菌和抗真菌两种类型的抗生素，所以制成的病毒保存液套装是严格无菌的。

病毒采样管为什么要分灭活型和非灭活型？

对于不同的检测目的，需要选择不同的病毒采样管，目前广泛使用的这两种病毒采样管各有特点。为了满足不同的检测要求，以及不同的病毒检测实验室条件，选择不同的病毒采样管是非常有必要的。

为什么要使用病毒采样管？

在进行病毒标本采集时，通常标本都不能马上进行PCR检测，往往需要将样本进行运输，而病毒本身在体外很快就会裂解掉影响后续检测，所以在保存和运输时，就需要加入病毒保存液。

灭活型病毒采样管和非灭活型病毒采样管有什么不一样？

灭活型病毒采样管：

灭活型病毒采样管主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液。采样时内含高浓度的胍盐即可高效灭活病毒，能够有效地阻止操作员二次感染，但是又含有Rnase抑制剂，能保护病毒核酸不被降解，从而使后续能通过NT-PCR进行检测。而且能够在常温下保存相对较长的时间，节省了病毒样品保存以及 运输的成本。

非灭活型病毒采样管：

非灭活型病毒采样管主要是以运送培养基为基础改良的病毒维持液型保存液。它能够保持病毒在体外的活性以及抗原和核酸的完整性，保护病毒蛋白质外壳不易分解，较大程度地保持了病毒样本的原始性，这种保存液除了用于核酸提取检测外，还能用于病毒的培养、分离以及抗原的检测等，但是采样后长时间保存需要保持严格低温。

注意事项：

不管是灭活型还是非灭活型，在采样之前的病毒采样管都必须严格灭活杀菌，保证管内没有其他生物，致使采样后病毒分解或其他影响造成错误检测。拭子采样后，如果使用质量欠缺的采集工具或保存液，会影响后续的检测结果甚至造成误诊的假阳性，因此一定要选择具有专业资质厂家生产的病毒采样管。

病毒采样管是商业化的产品吗？

你是不是很好奇病毒采样管是商业化的产品吗？不然为什么可以进行买卖呢？准确来说病毒采样管是属于医疗器械产品，国内很多生产企业都是依照一类产品存案的，之前为了满足疫情暴发的紧迫需求，有很多企业都是走的“应急通道”申请的一类存案许可。

病毒采样管是微生物采样运送管中用于流感病毒、手足口病毒等病毒采样的一种和拭子成套出售采样的离心管，又称为标本运送管。

病毒采样管有哪些用途？

①、病毒采样管可用于疾控部分、临床部分对传染病原微生物监测采样使用。适用于流感病毒、手足口病毒及其他类型的病毒采样，也可以用于支原体、衣原体、脲原体等的采样。

②、可用于从采样现场到实验室运送鼻咽拭子标本或特定部位的安排标本，以待进行PCR提取与检测。

③、可用于保存鼻咽拭子样本或特定部位的安排标本，以待进行必要的细胞培养。

病毒采样管的作用原理：

将采样管灭菌处理后，加入Hank’s基础液等病毒稳定成分，可在较宽的温度范围内维持病毒的活性，下降病毒分解速度，提升病毒提取的阳性率。

病毒采样管是商业化的产品吗？

注意事项：

①、使用病毒采样管采样应尽快送检，

②、采集样本后应置于2~8℃短期放置48小时；长期保存应置于-80℃的低温条件下进行保存

③、采集病毒样本时应该严格地按照采样程序进行，做到采样部位精准，采样力度均一合适，否则会影响病毒提取阳性率。

④、禁止用病毒保存液沾湿拭子后进行采样，病毒保存液不可以直接接触被采样者的身体任何部位。

⑤、产品一旦过期或者是包装破损禁止使用；

⑥、本产品仅用于病毒类样本的采样，

新冠病毒的核酸检测法

新型冠状病毒的检测方法主要包含核酸检测、抗体检测、抗原检测几种方法。由于抗原检测检出率较低，目前新冠检测主要集中在抗体和核酸检测。核酸检测目前是新冠病毒检测的“金标准”，具有早期诊断、灵敏度高和特异性高等特点；但抗体检测操作便捷、检测迅速，可作为核酸诊断的补充手段，但由于抗体检测“假阳性”和“假阴性”的局限性，不适合用于复工复产复学等普通人群筛查，也不适用于在低流地区的流行病学调查。

检测原理：

所有生物除朊病毒外都含有核酸，核酸包括脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）。新型冠状病毒（2019-nCoV）属于Beta冠状病毒属，该病毒是蛋白包裹的单链正链RNA病毒，寄生和感染高等动物（包括人）。病毒中特异性RNA序列是区分该病毒与其他病原体的标志物，新型冠状病毒出现后，我国科学家已经成功发现了新型冠状病毒中的特异性核酸序列。如疑似患者样本中能检测到新型冠状病毒的特异性核酸序列，则认为该患者可能被新型冠状病毒特异性核酸序列的方法是荧光定量PCR（聚合酶链式反应）。由于新型冠状病毒是RNA病毒，试剂盒检测基本都采用反转录加实时聚合酶链式反应法（RT-PCR）,扩增病原体的核酸（RNA）,同时通过荧光探针实时检测扩增产物。在PCR反应体系中，包含一对特异性引物以及一个Taqman探针，该探针为一段特异性寡核苷酸序列，两端分别标记了报告荧光基团和淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；如反应体系存在靶序列，PCR反应时探针与模板结合，DNA聚合酶沿模板利用酶的外切酶活性将探针酶切降解，报告基团与淬灭基团分离，发出荧光。每扩增一条DNA；链，就有一个荧光分子产生。荧光定量PCR仪能够监测出荧光到达预先设定阈值的循环数（Ct值）与病毒核酸浓度有关，病毒核酸浓度越高，Ct值越小。不同生产企业的产品会依据自身产品的性能确定本产品的阳性判断值。

由于每个RT-PCR反应需要2个小时左右才出结果，因此，试剂盒在开发时一般都针对病毒序列中高度保守的2~3各序列比如编码replicase（复制酶）或者necleocapsid（核蛋白衣，核鞘）的核酸序列设计引物，但是各个方法用的序列都不完全相同。一些方法使用multiplex，也就是把多个目标序列在同一反应管中扩增；另一些采用分步，先用一个目标序列筛查，阳性后再用另一个序列确认，这样可以有效缩短整个流程时间，加快检测速度。另外RNA病毒变异很快，用多个保守目标序列可以防止病毒变异造成的假阴性。

目前批准产品均基于新型冠状病毒基因组中开放读码框1a/b（open reading frame 1ab，ORF1ab）、包膜蛋白（Envelope  protein，E）和核衣壳蛋白（nucleocapsid protein，N）进行选择。不同产品的检测原理基本一致，但是其引物、探针设计存在不同，有单靶区段（ORF1ab）、双靶区段（ORF1ab、N蛋白）、三靶区段（ORF1ab、N蛋白和E蛋白）的检测和判读差别。一般检测位于病毒ORF1ab和N基因上的两个靶标，同一份标本需满足双靶标阳性或重复检测为单靶标阳性或两种标本同时满足单靶标才能确认SARS-CoV-2病毒核酸阳性。

检测流程：

检测程序需要经过五个步骤，取样、留样、保存、核酸提取、上机检测。首先根据试剂盒说明书进行样本采集，样本类型包括咽拭子、鼻拭子、痰液、支气管灌洗液、肺泡灌洗液等。由于RNA易降解，因此，采集样本时使用无RNA酶的拭子和无RNA酶的储存管。获得患者样本后，需尽快进行检测，如无法立即检测需要进行低温封装，并送到专门的检测机构进行检测。检测机构收到样本后，对样本进行核酸提取，核酸提取试剂应使用批准产品说明书中指定的核酸提取试剂盒。最后是荧光PCR核酸检测，也就是上机器检测，将提取物进行荧光PCR扩增反应，需要70—80分钟。