病毒采样管保存液中的抗菌抗生素

病毒保存液是用于病毒的采样、运输保存和检测的溶液介质，添加了病毒保存液内，有灭活型和非灭活型两种。其中，非灭活保存液需要添加抗菌抗生素，包括抗细菌抗生素和抗真菌抗生素。

非灭活型病毒保存液由于需要保存病毒的核酸以及蛋白膜上的抗原表位，需保留完整的病毒结构，尽量延长病毒体外存活时间，因此需要添加细菌和真菌的抗生素防止长菌对病毒造成干扰。细菌抗生素通常用的是庆大霉素，这里主要介绍几种抗真菌抗生素。

病毒采样管保存液中的抗菌抗生素

两性霉素b：上世纪50年代由链霉菌的培养液中分离而得到的一种多烯类光谱抗深部真菌感染的抗生素。pH在4~10时稳定，在中性或酸性介质中可形成盐，引起抗菌活性降低。它能选择性地与真菌胞浆膜上的麦角固醇相结合，在膜上形成微孔或通道，从而改变胞浆膜的通透性，导致真菌细胞内钠离子、核苷酸、氨基酸等物质外漏，正常代谢被破坏而起到抑菌的作用。

制霉素：

制霉素是一种多烯型抗生素，具有共轭多烯大环内酯结构，与良性霉素结构类似，能抑制真菌和皮藓菌的活性，对细菌无抑制作用。

灰黄霉素：

灰黄霉素能抑制真菌有丝分裂，使有丝分裂的纺锤结构断裂，终止中期细胞分裂。本品沉积在皮肤、毛发的角蛋白的前体细胞内，能促使角蛋白抵抗真菌的侵入；当感染角蛋白脱落后，代之以健康组织。对表皮藓菌属、小孢子菌属和毛藓菌属引起的皮肤真菌感染有效，对其他真菌感染包括念珠菌属以及细菌无效。此外，酮康唑、特比萘芬、十一烯酸、水杨酸等药物也具有抗真菌的作用。

深圳市华晨阳科技有限公司的非灭活病毒保存液中添加有抗细菌和抗真菌两种类型的抗生素，所以制成的病毒保存液套装是严格无菌的。

病毒采样管为什么要分灭活型和非灭活型？

对于不同的检测目的，需要选择不同的病毒采样管，目前广泛使用的这两种病毒采样管各有特点。为了满足不同的检测要求，以及不同的病毒检测实验室条件，选择不同的病毒采样管是非常有必要的。

为什么要使用病毒采样管？

在进行病毒标本采集时，通常标本都不能马上进行PCR检测，往往需要将样本进行运输，而病毒本身在体外很快就会裂解掉影响后续检测，所以在保存和运输时，就需要加入病毒保存液。

灭活型病毒采样管和非灭活型病毒采样管有什么不一样？

灭活型病毒采样管：

灭活型病毒采样管主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液。采样时内含高浓度的胍盐即可高效灭活病毒，能够有效地阻止操作员二次感染，但是又含有Rnase抑制剂，能保护病毒核酸不被降解，从而使后续能通过NT-PCR进行检测。而且能够在常温下保存相对较长的时间，节省了病毒样品保存以及 运输的成本。

非灭活型病毒采样管：

非灭活型病毒采样管主要是以运送培养基为基础改良的病毒维持液型保存液。它能够保持病毒在体外的活性以及抗原和核酸的完整性，保护病毒蛋白质外壳不易分解，较大程度地保持了病毒样本的原始性，这种保存液除了用于核酸提取检测外，还能用于病毒的培养、分离以及抗原的检测等，但是采样后长时间保存需要保持严格低温。

注意事项：

不管是灭活型还是非灭活型，在采样之前的病毒采样管都必须严格灭活杀菌，保证管内没有其他生物，致使采样后病毒分解或其他影响造成错误检测。拭子采样后，如果使用质量欠缺的采集工具或保存液，会影响后续的检测结果甚至造成误诊的假阳性，因此一定要选择具有专业资质厂家生产的病毒采样管。

病毒采样管是商业化的产品吗？

你是不是很好奇病毒采样管是商业化的产品吗？不然为什么可以进行买卖呢？准确来说病毒采样管是属于医疗器械产品，国内很多生产企业都是依照一类产品存案的，之前为了满足疫情暴发的紧迫需求，有很多企业都是走的“应急通道”申请的一类存案许可。

病毒采样管是微生物采样运送管中用于流感病毒、手足口病毒等病毒采样的一种和拭子成套出售采样的离心管，又称为标本运送管。

病毒采样管有哪些用途？

①、病毒采样管可用于疾控部分、临床部分对传染病原微生物监测采样使用。适用于流感病毒、手足口病毒及其他类型的病毒采样，也可以用于支原体、衣原体、脲原体等的采样。

②、可用于从采样现场到实验室运送鼻咽拭子标本或特定部位的安排标本，以待进行PCR提取与检测。

③、可用于保存鼻咽拭子样本或特定部位的安排标本，以待进行必要的细胞培养。

病毒采样管的作用原理：

将采样管灭菌处理后，加入Hank’s基础液等病毒稳定成分，可在较宽的温度范围内维持病毒的活性，下降病毒分解速度，提升病毒提取的阳性率。

病毒采样管是商业化的产品吗？

注意事项：

①、使用病毒采样管采样应尽快送检，

②、采集样本后应置于2~8℃短期放置48小时；长期保存应置于-80℃的低温条件下进行保存

③、采集病毒样本时应该严格地按照采样程序进行，做到采样部位精准，采样力度均一合适，否则会影响病毒提取阳性率。

④、禁止用病毒保存液沾湿拭子后进行采样，病毒保存液不可以直接接触被采样者的身体任何部位。

⑤、产品一旦过期或者是包装破损禁止使用；

⑥、本产品仅用于病毒类样本的采样，

新冠病毒的核酸检测法

新型冠状病毒的检测方法主要包含核酸检测、抗体检测、抗原检测几种方法。由于抗原检测检出率较低，目前新冠检测主要集中在抗体和核酸检测。核酸检测目前是新冠病毒检测的“金标准”，具有早期诊断、灵敏度高和特异性高等特点；但抗体检测操作便捷、检测迅速，可作为核酸诊断的补充手段，但由于抗体检测“假阳性”和“假阴性”的局限性，不适合用于复工复产复学等普通人群筛查，也不适用于在低流地区的流行病学调查。

检测原理：

所有生物除朊病毒外都含有核酸，核酸包括脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）。新型冠状病毒（2019-nCoV）属于Beta冠状病毒属，该病毒是蛋白包裹的单链正链RNA病毒，寄生和感染高等动物（包括人）。病毒中特异性RNA序列是区分该病毒与其他病原体的标志物，新型冠状病毒出现后，我国科学家已经成功发现了新型冠状病毒中的特异性核酸序列。如疑似患者样本中能检测到新型冠状病毒的特异性核酸序列，则认为该患者可能被新型冠状病毒特异性核酸序列的方法是荧光定量PCR（聚合酶链式反应）。由于新型冠状病毒是RNA病毒，试剂盒检测基本都采用反转录加实时聚合酶链式反应法（RT-PCR）,扩增病原体的核酸（RNA）,同时通过荧光探针实时检测扩增产物。在PCR反应体系中，包含一对特异性引物以及一个Taqman探针，该探针为一段特异性寡核苷酸序列，两端分别标记了报告荧光基团和淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；如反应体系存在靶序列，PCR反应时探针与模板结合，DNA聚合酶沿模板利用酶的外切酶活性将探针酶切降解，报告基团与淬灭基团分离，发出荧光。每扩增一条DNA；链，就有一个荧光分子产生。荧光定量PCR仪能够监测出荧光到达预先设定阈值的循环数（Ct值）与病毒核酸浓度有关，病毒核酸浓度越高，Ct值越小。不同生产企业的产品会依据自身产品的性能确定本产品的阳性判断值。

由于每个RT-PCR反应需要2个小时左右才出结果，因此，试剂盒在开发时一般都针对病毒序列中高度保守的2~3各序列比如编码replicase（复制酶）或者necleocapsid（核蛋白衣，核鞘）的核酸序列设计引物，但是各个方法用的序列都不完全相同。一些方法使用multiplex，也就是把多个目标序列在同一反应管中扩增；另一些采用分步，先用一个目标序列筛查，阳性后再用另一个序列确认，这样可以有效缩短整个流程时间，加快检测速度。另外RNA病毒变异很快，用多个保守目标序列可以防止病毒变异造成的假阴性。

目前批准产品均基于新型冠状病毒基因组中开放读码框1a/b（open reading frame 1ab，ORF1ab）、包膜蛋白（Envelope  protein，E）和核衣壳蛋白（nucleocapsid protein，N）进行选择。不同产品的检测原理基本一致，但是其引物、探针设计存在不同，有单靶区段（ORF1ab）、双靶区段（ORF1ab、N蛋白）、三靶区段（ORF1ab、N蛋白和E蛋白）的检测和判读差别。一般检测位于病毒ORF1ab和N基因上的两个靶标，同一份标本需满足双靶标阳性或重复检测为单靶标阳性或两种标本同时满足单靶标才能确认SARS-CoV-2病毒核酸阳性。

检测流程：

检测程序需要经过五个步骤，取样、留样、保存、核酸提取、上机检测。首先根据试剂盒说明书进行样本采集，样本类型包括咽拭子、鼻拭子、痰液、支气管灌洗液、肺泡灌洗液等。由于RNA易降解，因此，采集样本时使用无RNA酶的拭子和无RNA酶的储存管。获得患者样本后，需尽快进行检测，如无法立即检测需要进行低温封装，并送到专门的检测机构进行检测。检测机构收到样本后，对样本进行核酸提取，核酸提取试剂应使用批准产品说明书中指定的核酸提取试剂盒。最后是荧光PCR核酸检测，也就是上机器检测，将提取物进行荧光PCR扩增反应，需要70—80分钟。

在核酸检测中灭活型病毒保存液具有什么优势？

年前，国家卫健委疾控局在国务院联防联控机制新闻发布会上表示，春节返乡人员要拿着7日以内的核酸阴性检测证明才能够返乡。同时返乡人员返回工作地上班时也要做核酸检测。

检测机构要在收到样本后的12小时内反馈检测结果；如果说一定要返乡，返乡人员需持有7日以内的核酸检测阴性证明才能够返乡，这势必会增加医护人员的检测压力，在核酸检测过程中安全性也会变得极为重要，我们通常选用灭活型的病毒保存液来保存核酸。不只是因为它不需要保留病毒活性，更在于它杀灭病毒的同时不会对后续的病毒核酸检测造成影响。

灭活病毒还有以下这些优势：

①、容易保存病毒，而且不容易被降解

灭活型病毒保存液可在常温保存病毒而且运输过程中病毒不容易被降解，按大多数商业化试剂盒进行提取后，获得DNA/RNA质量好，得率高，可完成各种基因检测及分析实验，如PCR、qPCR等。

②、可降低RNA被降解从而造成假阴性的概率

核酸样本保存条件苛刻，RNA极易裂解，4℃仅可存放24h，运输过程过长RNA就会出现提前被降解的现象，从而导致检测假阴性增多。灭活型病毒保存液是采样管内的一种病毒样本保护性运输介质，防止病毒采样后不能及时检测在送检过程中病毒降解，避免因病毒在检测途中提前降解造成假阴性。

③、可以减少核酸提取过程中的感染

灭活型病毒保存液是高效灭活病毒的，在采样与检测环节都比非灭活保存液安全性高，不会造成二次感染，所以操作要求和实验环境要求都稍微低一些。对于快速核酸检测的效率和核酸检测覆盖率来说更有优势。

④、适用于多种病毒检测

灭活型病毒保存液适用于新冠病毒、流感病毒、手足口病毒等常见的病毒样本采集保存运输工作，可采集咽拭子鼻拭子或特定部位组织样本，储存的样本可用于后续的核酸提取或纯化等临床试验。

随着疫情的反复，核酸检测对于广大商家而言无疑是个大商机，而核酸检测的核心部分就是病毒保存液，所以病毒保存液在市面上的竞争也与日俱增。这就导致有的厂商为了趁热度捞钱，在产品质量上可能就有所偏差出入了，很多客户在选择产品时不了解产品的特性，先将就使用一下，结果就会出现很多不愿意看到的事故问题。那如何选择优质而不将就的病毒采样管厂家呢？且随我来看一看。

①、厂家能够解答使用方面的各种难题。

口碑好的病毒采样管厂家善于实施市场调研工作，能够通过大量资料和数据的收集，整合出令客户颇为烦恼的棘手难题，并作出细致分类。这样一来，在接待客户的过程中，能从只言片语中迅速抓取到有效信息，加以全方位解答，很多问题都是根据统计发现属于客户普遍会遇到的困扰。而优质的病毒保存液厂家能够为采购者提供合理的使用方案和解决问题的方案，帮助采购者获得更好的使用效果。

②、能够确保病毒保存液原料的优质

高度负责任的病毒采样管厂家不仅能够兑现许下的承诺，还能确保在不夸大的前提下描述事实，例如对于原材料的筛选严格到位，杜绝弄虚作假。而不负责任的厂家只会为了促单而大肆渲染，在此过程中，消费者应该擦亮双眼、明辨是非。

③、病毒保存液价格是否合理

采购任何产品，价格都是非常关键的一个因素，因为疫情原因导致很多企业的常规产品销售情况并不良好，所以市场上有很多企业为了生存会以次充好，低价售卖，这样的产品虽然价格低廉，但是品质没有保证，价格和价值往往是相对应的，如果病毒保存液的价格如果远远低于市场平均价，那么就要认真考虑一下其质量是否可靠。因此，采购者在选择病毒保存液厂家的时候要注意不能一味的追求低价格。

④、物流运输是否安全可靠

因为病毒保存液是液态的，如果包装不到位稍有颠簸就会发生渗漏，这样就会给客户带来非常大的损失，所以在包装材质的遴选、结构的设计、制造工艺等这些方面一定要把好关，发货前做到“百试不漏”，只有在细节方面做到位，客户才会源源不断。